PAPER

DIAGNÓSTICO GENÉTICO PRENATAL NO INVASIVO DE FACTOR RH Y SEXO FETAL A TRAVÉS DEL ANÁLISIS DE ADN FETAL LIBRE EN PLASMA MATERNO 

Non invasive prenatal genetic diagnosis of fetal RhD and sex through the analysis of free fetal DNA in maternal plasma

Lic. Carla Sesarinia, Dra. María Laura Giménezb, Lic. María, Ana Redala, Dr. Gustavo Izbizkyb, Dr. Horacio Aiellob, Dr. Pablo Argibaya y Dr. Lucas Otaño.

• Unidad de Medicina Molecular y Genómica, Instituto de Ciencias Básicas y Medicin Experimental (ICBME). 
• Servicio de Obstetricia. Instituto Universitario, Escuela de Medicina del Hospital Italiano de Buenos Aires. 

Arch Argent Pediatr 2009; 107(5):405-409 (Articulo Original) 

RESUMEN 

Introducción. El análisis de ADN fetal libre en plasma materno permite estudiar material gené­tico del feto sin realizar procedimientos invasi­vos sobre el embarazo. 

Objetivo. Evaluar la factibilidad y desempeño diagnóstico de la determinación del genotipo RhD y del sexo fetal a través del análisis mo­lecular de ADN fetal libre en plasma de emba­razadas mediante reactivos de uso general en biología molecular. 

Material y métodos. Se extrajeron 109 muestras de sangre de embarazadas. Se amplificó por PCR en tiempo real una porción del gen RhD para el diagnóstico de Rh fetal en mujeres Rh-negativas y una región del cromosoma Y para la determi­nación del sexo fetal. Ambos datos se compara­ron con los resultados neonatales. 

Resultados. Respecto de las 109 muestras, 26 embarazos están en curso, 4 tuvieron abortos espontáneos y en 3 se perdió el seguimiento. De las 76 restantes con resultado neonatal, en 65 mujeres Rh-negativas se efectuó el análisis del gen RhD para la determinación del Rh fe­tal y en 66 muestras se realizó la determinación del sexo fetal. Quince muestras fueron no con­cluyentes y se excluyeron del análisis. El valor predictivo para RhD-positivo y RhD-negativo fue 85% y 90%, respectivamente, mientras que la predicción de sexo masculino fue 94,3% y la del femenino 95%. 

Conclusiones. La determinación no invasiva del RhD y sexo fetal en plasma materno mediante reactivos de uso general en biología molecular fue factible en la mayoría de los casos, con un desempeño diagnóstico similar al descripto en la bibliografía. 

Palabras clave: ADN fetal libre, diagnóstico pre­natal, Rh fetal, sexo fetal. 

ABSTRACT

Introduction. The analysis of free fetal DNA in maternal plasma allows the assessment of fetal genetic material avoiding the necessity of inva­sive procedures during pregnancy. 

Objective. To evaluate the feasibility and the diagnostic performance of fetal sex and fetal RhD detection through the analysis of free fetal DNA in maternal plasma using standard reagents in molecular biology. 

Material and methods. A hundred and nine blood samples of pregnant women were obtai­ned. Amplification by real time PCR a sequence from the RhD gene in Rh negative patients and a Y-chromosome sequence, for the diagnosis of fetal Rh and sex respectively, were performed. Results were compared with neonatal outcomes. 

Results. From the 109 samples, 26 are still on­going, 4 ended in spontaneous abortions and in 3 were lost to follow up. From the remaining 76 samples with neonatal result, the determination of fetal Rh from the RhD gene was performed in 65 Rh negative women, whereas in 66 samples the fetal sex analysis was evaluated. Overall, 15 samples had not conclusive results and were ex­cluded from the study. The predictive values for RhD positive and negative were 85% and 90%, respectively, while the prediction for male sex was 94.3% and for female sex 95%. 

Conclusion. The non invasive determination of fetal RhD and sex in maternal plasma using standard reagents in molecular biology was feasible in the majority of the samples, with a diagnostic performance similar to the reported in the literature. 

Key words: free fetal DNA, prenatal diagnosis, fe­tal Rh, fetal sex. 

Nuevo descubrimiento aporta este documento: 

• El presente estudio muestra que el diagnóstico genético prenatal no invasivo del RhD fetal y del sexo fetal a través del análisis de ADN fetal libre en plasma materno fue factible en la mayoría de los casos, con un alto grado de exactitud. 

• La detección de secuencias de ADN fetal en sangre de mujeres embarazadas abre las puertas al diagnóstico prenatal no invasivo. 

• El protocolo de la­boratorio aplicado en el presente estudio implica la factibilidad del diagnóstico prenatal no inva­sivo con costos significativamente menores que la metodología actualmente empleada en países desarrollados. 

--- Una de las formas más fáciles y/o factibles de contarle a las personas o informarles sobre la existencia del descubrimiento que este documento o paper contiene seria por las redes sociales o por los medio de comunicación ya que al fin y al cabo hoy en día son la nuestra principal fuente de información; y en mi opinión habría que plantear una explicación practica y sencilla para que toda la sociedad logre entender la importancia que este conlleva y de esta manera incitarlos a “correr la voz” para que esta información llegue a mano de otros, ya sean científicos o personas que quieran hacer parte de dicha investigación. --- 

AVANCES EN LA DETERMINACIÓN DEL FACTOR RH Y SEXO FETAL POR MEDIO DE MÉTODOS NO INVASIVOS

Estudios recientes indican que es posible realizar análisis de ADN fetal libre en el plasma materno sin necesidad del uso de métodos invasivos y a relativamente bajo costo. Este es el caso de las investigaciones llevadas a cabo por médicos de la Unidad de Medicina Molecular y Genómica del Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental (ICBME) y del Servicio de Obstetricia del Instituto Universitario, Escuela de Medicina del Hospital Italiano de Buenos Aires. 

Con el objetivo de evaluar la factibilidad y desempeño diagnóstico de la determinación del genotipo RhD y del sexo fetal a través del análisis mo­lecular de ADN fetal libre en plasma, se extrajeron 109 muestras de sangre de embarazadas y se compara­ron ambos datos con los resultados neonatales para los cuales el valor predicho para RhD-positivo y RhD-negativo fue 85% y 90%, respectivamente, mientras que la predicción de sexo masculino fue 94,3% y la del femenino 95%. 

La investigación concluyo finalmente que la determinación no invasiva del RhD y sexo fetal en plasma materno mediante marcadores de ácidos nucleicos fetales abre las puertas al diagnóstico prenatal no invasivo a bajo costo, ya que los reactivos empleados en el presente estudio son aplicados generalmente en biología molecular.